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正確?使用血清的注意事項(xiàng)及凍存方法
使用血清時(shí)的注意事項(xiàng)具體如下:
1.供血的重生小牛必須是健康牛的產(chǎn)仔,并在產(chǎn)后24小時(shí)內(nèi)抽血,此期間不得吸取母乳。
2.以無(wú)菌操作自頸動(dòng)脈放血,并在無(wú)菌條件下分離血清及濾菌,全過程在36小時(shí)內(nèi)完成。經(jīng)濾菌的血清登一2 0 IC保存。
3.血清使用前需做細(xì)蔭、支原體培育及內(nèi)毒素測(cè)定,在的確無(wú)污染的情況下方可使用。
4.每批小牛血清測(cè)定總蛋白含量并別離配成10%,20%,25%于墓礎(chǔ)培育墓和HAT培育墓中,對(duì)骨髓瘤細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行培育,觀察小牛血清對(duì)瘤細(xì)胞和融合細(xì)胞的細(xì)胞毒性。若在20%濃度小牛血清情況下,細(xì)胞生長(zhǎng)差或死亡,則該批小牛血清不適宜使用。
怎樣凍住血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損:
1.將血清從冷凍箱中取出后,先置于2-8℃冰箱中使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但有必要注重的是,溶解進(jìn)程中有必要規(guī)矩地?fù)u晃均勻。
2.血清凍住后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉積物出現(xiàn),該怎樣處置
3.血清中沉積物的出現(xiàn)有許多緣由,但遍及的緣由是因?yàn)檠逯兄鞍椎淖冃詷?gòu)成的;而血纖維蛋白在血清凍住后,也會(huì)存在于血清中,亦是構(gòu)成血清沉積物的首要緣由之一。但這些絮狀沉積物,并不影響血清自身的質(zhì)量。若您欲去掉這些絮狀沉積物,可以將血清分裝至無(wú)菌離心管中,以400g略微離心,上清液即可接著參與培育基內(nèi)一起過濾。不建議您以過濾的辦法去掉這些絮狀沉積物,因?yàn)樗赡軙?huì)堵塞您的過濾膜。
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