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教您怎么辨別胎牛血清的真假!
一、外觀
拿到血清,最先接觸的是血清外觀,對(duì)于缺缺少細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)的人來(lái)說(shuō),外觀的判斷尤為重要
1、顏色
根據(jù)血紅蛋白含量的不同,胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或紅色,我國(guó)的細(xì)胞培養(yǎng)用血清標(biāo)準(zhǔn)是不高于20mg/dl,實(shí)際上,血紅蛋白含量的高低對(duì)血清并無(wú)直接影響,這個(gè)指標(biāo)的意義在于能體現(xiàn)出采血過(guò)程的嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范程度,良好的操作能降低血清的溶血。
國(guó)產(chǎn)血清的采血點(diǎn)很分散,大多是由屠戶采血后馬上離心收集,所以很少會(huì)有溶血,表現(xiàn)出明亮的蠟黃色,當(dāng)然,國(guó)產(chǎn)血清也很少有標(biāo)準(zhǔn)意義上的胎牛血清。
進(jìn)口胎牛血清或多或少總有點(diǎn)溶血,因?yàn)檎嬲奶ヅQ迥δ懿?,紅細(xì)胞容易破裂。
總的來(lái)說(shuō),國(guó)產(chǎn)的血清呈現(xiàn)出蠟黃。進(jìn)口的血清,呈現(xiàn)出談黃、微紅色,差點(diǎn)的呈現(xiàn)出橘紅色或鮮紅色。當(dāng)然,熱滅活血清或保存不當(dāng)?shù)难?,由于血紅蛋白的破壞氧化,會(huì)呈現(xiàn)出暗紅,甚至咖啡色。
2、沉淀
很多血清客戶,會(huì)發(fā)現(xiàn)進(jìn)口血清有沉淀,從而懷疑血清的質(zhì)量問(wèn)題,這是沒(méi)有根據(jù)的。
血清中的沉淀是由纖維蛋白的凝聚產(chǎn)生,對(duì)血清質(zhì)量沒(méi)有任何影響,沉淀的產(chǎn)生原因很多,和廠家的加工生產(chǎn)方式密切相關(guān)。
國(guó)產(chǎn)的血清,大多來(lái)自北方,由于價(jià)格低廉,保存環(huán)境都不好,從采血、冷凍、運(yùn)輸?shù)缴a(chǎn)會(huì)經(jīng)過(guò)多次凍融,每次凍融過(guò)程,就會(huì)析出部分纖維蛋白沉淀,這樣,血清成品過(guò)濾后看起來(lái)反而更加的“干凈”,很少有沉淀產(chǎn)生。
進(jìn)口的胎牛血清,過(guò)濾分裝前很少會(huì)反復(fù)凍融,生產(chǎn)后的成品也是清澈的,但隨著時(shí)間的推移,血清中的大量纖維蛋白會(huì)析出形成沉淀。當(dāng)然,進(jìn)口的新生牛血清,一般牛齡都在2周左右,血清中的各種蛋白含量明顯偏高,生產(chǎn)后血清可能會(huì)渾濁,甚至有大量沉淀。
當(dāng)然,購(gòu)買回來(lái)的血清都是冰凍狀態(tài),使用時(shí)需要融化,融化過(guò)程最好在溫度較低的狀態(tài)下慢慢進(jìn)行,否則沉淀相對(duì)較多,雖然沉淀并不直接影響血清的質(zhì)量,但對(duì)細(xì)胞的顯微觀察有一定的阻礙。
3、澄清度
進(jìn)口胎牛血清由于蛋白和脂類等物質(zhì)含量低,表現(xiàn)為稀薄、清淡,而國(guó)產(chǎn)血清,因?yàn)榻^大多數(shù)是新生牛血清,相對(duì)而言更加粘稠,顏色略深,這對(duì)于初步接觸血清的人很難判斷,但把兩者進(jìn)行對(duì)比,可容易分辨。
二、主要技術(shù)指標(biāo)
目前國(guó)內(nèi)血清的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)是2005版的《中華人民共和國(guó)藥典》,主要指標(biāo)有以下幾點(diǎn):
1、內(nèi)毒素
標(biāo)準(zhǔn)為不高于5EU/ml。內(nèi)毒素是細(xì)菌破碎后細(xì)胞壁的成分,因此內(nèi)毒素含量的高低可表現(xiàn)出采血到生產(chǎn)一系列過(guò)程中的無(wú)菌操作情況。目前,國(guó)產(chǎn)血清基本都能達(dá)到這一要求,很多進(jìn)口胎牛血清內(nèi)毒素含量反而更高,只要求不高于50EU/ml,高出我國(guó)標(biāo)準(zhǔn)10倍??梢?jiàn),內(nèi)毒素含量偏高不影響質(zhì)量,除非含量*,預(yù)示著已經(jīng)污染。
2、總蛋白含量
胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml,數(shù)值偏高,說(shuō)明采血的牛齡偏大,不是胎牛,數(shù)值偏低,表明血清可能摻水了。
3、血紅蛋白
標(biāo)準(zhǔn)為不高于20mg/dl,顏色越紅,數(shù)值越高,反之,數(shù)值越低。
4、pH
國(guó)產(chǎn)血清,大多高于7.5,進(jìn)口胎牛血清,大多低于7.5,具體原因未知,可能和牛齡有關(guān),這也能用來(lái)初步鑒別血清的來(lái)源。
5、微生物
包括細(xì)菌、霉菌、支原體、噬菌體、各類病原性病毒等。隨著國(guó)內(nèi)血清廠家生產(chǎn)條件的改善提高,細(xì)菌、霉菌等“大型”微生物幾乎能控制,支原體經(jīng)過(guò)0.1um過(guò)濾,大多也能清除。大腸桿菌噬菌體的污染還是比較嚴(yán)重的,主要是生產(chǎn)環(huán)境過(guò)程中帶入,又無(wú)法過(guò)濾,很難*清除,但對(duì)血清質(zhì)量影響不大。病原性病毒,特別是BVDV,在國(guó)產(chǎn)血清中幾乎90%以上都存在,這類微生物是影響國(guó)產(chǎn)血清質(zhì)量的重要因素之一,而進(jìn)口胎牛血清中基本都控制的很好。
6、免疫球蛋白
國(guó)產(chǎn)血清的只是定性檢測(cè),結(jié)果也很不準(zhǔn)確,進(jìn)口胎牛血清大多定量檢測(cè)。免疫球蛋白的數(shù)值能*體現(xiàn)出采血的時(shí)的牛齡情況,國(guó)產(chǎn)血清,基本都是新生牛的,血清中容易產(chǎn)生IgM,IgG的含量也偏高,進(jìn)口胎牛血清,不含IgM,IgG的含量也較低。
7、其它
不管是國(guó)產(chǎn)還是進(jìn)口血清,都是不測(cè)抗生素的(無(wú)四環(huán)素胎牛血清除外)。國(guó)外,抗生素的使用很嚴(yán)格,用量也很少,每頭奶牛的產(chǎn)品包括血清都可以溯源的,因此可以做到胎牛血清中不含抗生素或含量極低;國(guó)內(nèi),抗生素的濫用已成了普遍現(xiàn)象,血清中殘留很高,對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)極為不利,這是國(guó)產(chǎn)血清質(zhì)量差的根本原因。
本公司長(zhǎng)期供應(yīng)各種動(dòng)物血清:
?、賱?dòng)物血清系列:
胎牛血清,特級(jí)新生牛血清,優(yōu)級(jí)新生牛血清,標(biāo)準(zhǔn)新生牛血清,標(biāo)準(zhǔn)馬血清,特級(jí)馬血清,山羊血清,綿羊血清,兔血清,雞血清,豬血清,大牛血清,小牛血清,狗血清,驢血清,大鼠血清,小鼠血清,豚鼠血清,巴比西鼠血清。
②血漿系列:
胎牛血漿,新生牛血漿,大牛血漿,小牛血漿,兔血漿,馬血漿,山羊血漿,綿羊血漿,雞血漿,豬血漿,狗血漿,驢血漿,大鼠血漿,小鼠血漿,豚鼠血漿。
③脫纖維全血系列(玻璃瓶和Pet塑料瓶):
新生牛血,山羊血,綿羊血,馬血,驢血,兔血,兔紅細(xì)胞(20%),綿羊紅細(xì)胞(20%),雞紅細(xì)胞(20%),兔紅細(xì)胞(4%),綿羊紅細(xì)胞4%,雞紅細(xì)胞(4%)。
?、芸鼓盗校?/p>
新生牛血,山羊血,綿羊血,馬血,驢血
?、萘呀馊?脫纖維裂解,抗凝裂解)
脫纖維裂解血:小牛血,大牛血,山羊血,綿羊血,馬血,驢血
抗凝裂解血:小牛血,大牛血,山羊血,綿羊血,馬血,驢血
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