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大鼠抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)ELISA試劑盒的實驗使用說明書如下:
1. 試劑盒組成
?酶標包被板?:1×48或1×96孔,2-8℃保存?。
?標準品?:濃度為2700ng/L,0.5ml×1瓶,2-8℃保存?。
?標準品稀釋液?:1.5ml×1瓶?。
?酶標試劑?:3ml×1瓶(48孔配置)或6ml×1瓶(96孔配置)?。
?顯色劑A液和B液?:各3ml×1瓶(48孔配置)或6ml×1瓶(96孔配置)?。
?樣品稀釋液?:3ml×1瓶(48孔配置)或6ml×1瓶(96孔配置)?。
?封板膜?:2片?。
?說明書?:1份?。
2. 實驗步驟
?試劑準備?:將試劑盒從冰箱中取出,室溫平衡20-30分鐘?。
?標準曲線繪制?:以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,繪制標準曲線?。
?樣品處理?:血清、血漿、組織勻漿等樣品需離心去除沉淀,分裝后冷凍保存,避免反復凍融?。
?加樣?:依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,溫育并洗滌?。
?顯色?:加入底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化為黃色?。
?讀數(shù)?:使用酶標儀讀取OD值,根據(jù)標準曲線計算樣品濃度?。
3. 注意事項
?實驗誤差控制?:建議所有標準品、樣本和空白對照做雙份檢測,取平均值?。
?顯色控制?:若顯色過淺,可適當延長底物溫育時間?。
?樣品保存?:樣品宜在新鮮時檢測,避免細菌污染?。
?試劑保存?:開封后未用完的酶標包被板應立即裝入密封袋中加干燥劑保存?。
4. 實驗器材
?標準規(guī)格酶標儀?:用于讀取OD值?。
?自動洗板機?:用于洗滌微孔板?。
?37℃恒溫箱?:用于溫育反應?。
?移液器及吸頭?:建議使用多通道移液器以提高效率?。
?洗滌液?:使用中性PBS或TBS?。
以上內(nèi)容綜合了多個來源的實驗使用說明,確保實驗的準確性和可重復性?。
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