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兔子白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒實驗使用說明書
發(fā)布時間:2025/6/9瀏覽:108次
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  以下是兔子白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒的實驗使用說明綜合整理:

  BS-4207  兔子白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒

  一、實驗原理

  采用雙抗體夾心法:包被抗IL-1β抗體的微孔板捕獲樣本中的IL-1β,再與HRP標(biāo)記的檢測抗體結(jié)合形成復(fù)合物,TMB顯色后通過OD值定量分析。

  二、試劑盒組成

  標(biāo)準(zhǔn)品?:通常為凍干粉(如2700ng/L),需用稀釋液復(fù)溶

  酶標(biāo)試劑?:HRP標(biāo)記的檢測抗體(3ml/6ml)

  洗滌緩沖液?:50×濃縮液,需蒸餾水稀釋

  底物(TMB)?和?終止液?各12ml

  封板膜?、?密封袋?及說明書

  三、樣本處理要求

  血清/血漿?:

  避免溶血,離心條件:2000-3000rpm×10-30分鐘

  短期保存于2-8℃,長期需-20℃以下分裝,避免反復(fù)凍融

  組織勻漿?:

  按重量加入PBS勻漿,離心取上清

  細(xì)胞上清?:

  離心去除碎片后分裝凍存

  注意事項?:

  避免使用含NaN3的樣本(抑制HRP活性)

  四、操作步驟

  標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?:梯度稀釋至7個濃度,第8孔為空白對照

  加樣?:

  標(biāo)準(zhǔn)品/樣本各加50-100μl,37℃孵育1-2小時

  洗滌?:

  使用稀釋后的洗滌液,洗板4-6次,拍干

  顯色?:

  加TMB避光反應(yīng)15-30分鐘,終止后15分鐘內(nèi)測OD450nm

  五、注意事項

  試劑使用前需平衡至室溫,避免泡沫產(chǎn)生

  不同批號試劑不可混用,底物需避光保存

  顯色后若OD值超出標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍,需稀釋樣本復(fù)測

  六、數(shù)據(jù)計算

  以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)、OD值為縱坐標(biāo)繪制曲線,通過回歸方程計算樣本濃度。

  注:以上資料僅供參考,如需具體品牌試劑盒的完整說明書,可參考對應(yīng)廠商提供的文檔。

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