PCR技術(shù)是在體外人工復(fù)制DNA序列的一種方法，它是一項(xiàng)重要的分子生物學(xué)技術(shù)，并廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究，醫(yī)學(xué)診斷等領(lǐng)域。PCR板是PCR反應(yīng)時(shí)進(jìn)行反應(yīng)的試管架，常見(jiàn)的PCR板有96孔板和384孔板。本文將從PCR板使用前準(zhǔn)備，PCR反應(yīng)的制備等方面講解PCR板的使用方法。
1、準(zhǔn)備PCR反應(yīng)體系：PCR反應(yīng)體系是PCR反應(yīng)核心，其成份不同，可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇。通常包括模板DNA、引物、TaqDNA聚合酶、dNTPs等。做反應(yīng)體系應(yīng)遵循實(shí)驗(yàn)要求。
2、熟悉PCR板類型：通常有96孔板和384孔板等，需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求選擇不同的類型。為達(dá)到更好效果，要選擇質(zhì)量更好的PCR板。
3、準(zhǔn)備PCR板：一般情況下，需要將PCR板放置在洗滌劑中清洗一下，并以96孔板為例，在洗滌后將其平放在樣品塊上，輕輕拍平即可準(zhǔn)備好使用。
進(jìn)口PCR板的使用方法：
1、添加物質(zhì)到PCR板：將準(zhǔn)備好的反應(yīng)物質(zhì)依次加入PCR板中，最后加入H2O混合均勻。注意反應(yīng)混合液蒸發(fā)，加入少量礦物油保持親水性。
2、查看PCR板是否密封：為防止反應(yīng)液蒸發(fā)和污染，必須保持PCR板嚴(yán)密密封。如果使用透明蓋子，可以透過(guò)蓋子查看PCR板是否密封。
3、設(shè)置PCR反應(yīng)程序：根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求設(shè)置PCR反應(yīng)程序，包括溫度、時(shí)間、控制PCR板熱蓋的開(kāi)合等參數(shù)。合理的PCR反應(yīng)程序有利于提高PCR反應(yīng)質(zhì)量。
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